lb培养基(什么是LB培养基,以及LB培养基的分类
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂,通常不被微生物分解利用。尽管该该培养基的名称被广泛解释为Luria-Bertani培养基,根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
分类
1,液态培养基
根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.
培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础.
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)
2,固态培养基
LB固体培养基1L和液体一样,加15g~20g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。
1).配制100mlLB培养基加入1~1.5g琼脂粉
2).抗生素的加入高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置于55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3).倒板一般15ml-20ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4).保存用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
ph值需要控制在7.4