lb培养基(有抗性的lb液体培养基怎么配制)
生活百科 2022-08-06 20:24www.17kangjie.cn生活百科
LB液态培养基的配制中
配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入
胰化蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质溶解用5mol/LNaOH调pH至7.0。另用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
LB培养基是培养基中的一种生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种使菌种成倍扩增,达到使用要求。培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌。通过培养工程菌可以表达大量的外源蛋白也可以拿到带有外源基因的质粒工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。
LB固态培养基的配制
LB固体培养基1L和液体一样加15g琼脂粉一定要在温度降下之前加好抗生素并且倒好板。
LB固体培养基倒板
1.配制 100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉。
2.抗生素的加入高压灭菌后将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素以免温度过高导致抗生素失效并充分摇匀。
3.倒板一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后打开盖子在紫外下照10-15分钟。
4.保存用封口胶封边并倒置放于4℃保存一个月内使用。
在分子生物学试验中LB培养基常常用于培养细菌。如菌种的扩繁、转化体的筛选等。培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌